一种用于植物基因沉默的新RNAi载体的构建

• 作者: 代红艳 宋梦如 郭运娜 陈可钦 雷莹莹
• 来源期刊: 沈阳农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 基因沉默 遗传转化 载体 RNAi
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 719-724
• 页数: 6页
• 分类号: Q782
• 字数: 4322字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1700.2017.06.012

摘要

RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术是研究基因功能的一种常用方法.为解决目前植物RNAi载体构建繁琐复杂的问题,本研究以常用的植物过量表达载体pRI 101-AN为基础,在其多克隆位点处插入源自pKANNIBAL载体的内含子序列,获得pRNAi-E载体.在此基础上,只要将目的基因特异序列的正反向片段分别连接到内含子两侧,即可构建目的基因的RNAi载体.为了验证pRNAi-E载体的效果,苹果IA A 29(MdIA A 29)基因的正向和反向片段被插入到pRNAi-E载体上,获得了MdIA A 29基因的RNAi载体pRNAi-IAA29.通过农杆菌介导的遗传转化,获得了GL-3苹果的转基因株系.qRT-PCR数据显示转基因苹果植株中IA A 29的转录水平比非转基因对照显著下调,表明基于pRNAi-E构建的RNAi载体能够有效地沉默苹果内源基因的表达.本研究构建的pRNAi-E载体使得植物基因RNAi载体构建变得简单高效,对于开展植物基因功能验证研究具有一定意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	代红艳	沈阳农业大学园艺学院	45	577	14.0	23.0
2	陈可钦	沈阳农业大学园艺学院	2	0	0.0	0.0
3	雷莹莹	沈阳农业大学园艺学院	2	0	0.0	0.0
4	郭运娜	沈阳农业大学园艺学院	2	0	0.0	0.0
5	宋梦如	沈阳农业大学园艺学院	2	0	0.0	0.0