农杆菌介导的Cas9基因转化金针菇的研究

• 作者: 于海龙 刘建辉 刘建雨 尚晓冬 张丹 徐珍 杨慧 王瑞娟
• 来源期刊: 食用菌学报
• 关键词: 金针菇 农杆菌介导法 CRISPR/Cas9系统 Cas9
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 页码范围: 25-29
• 页数: 5页
• 字数: 3995字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16488/j.cnki.1005-9873.2017.03.005

摘要

将酿脓链球菌(Streptococcus pyogenes)Cas9序列(SpCas9序列,Addgene#43802)根据金针菇(Flammulina velutipes)的密码子偏好性进行优化,并构建FvCas9双元表达载体,利用农杆菌介导法转化金针菇单核体Dan3,经抗性培养基筛选以及潮霉素和Cas9基因PCR扩增验证,结果显示Cas9基因已经成功转入金针菇菌丝体中,转化率为6.84％.