检测鸭坦布苏病毒NS1抗体ELISA方法的建立

• 作者: 吴玄光 孙敏华 张建峰 张春红 李林林 胡奇林 董嘉文 邝瑞欢 郭建伟
• 来源期刊: 广东畜牧兽医科技
• 学科: 农学
• 关键词: 鸭坦布苏病毒 NS1蛋白 ELISA
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 37-40
• 页数: 4页
• 分类号: S858.32|Q349+.55
• 字数: 2976字
• 语种: 中文

摘要

为了检测鸭群中鸭坦布苏病毒的血清学流行情况,本研究在前期成功表达鸭坦布苏病毒NS1蛋白的基础上,建立了检测鸭血清中鸭坦布苏病毒抗体的间接ELISA方法.棋盘法确定了当纯化的NS1蛋白包被量为0.188μg/孔,待检血清1∶200稀释,HRP标记的兔抗鸭二抗1∶16000倍稀释时反应条件最佳.在最佳反应条件下,阴阳性临界值判定标准为0.467.用建立的间接ELISA方法对番鸭细小病毒、鹅细小病毒、鸭肝炎病毒、鸭疫里默氏杆菌阳性血清进行了检测,均无交叉反应,表明该方法具有良好的特异性.批内和批间重复试验的最大变异系数分别为6％和1 0％,显示该方法具有很好的稳定性.用建立的ELISA方法检测临床鸭坦布苏病毒感染鸭及攻毒蛋鸭的55份临床血清样品,测得52份为阳性,阳性率为94.5％,对36份阴性鸭群血清样品进行检测,36份为阴性,阴性率为100％.该方法为鸭坦布苏病毒的诊断和流行病学监测奠定了基础.