林烟草NsylCBL10启动子的克隆及功能分析

• 作者: 刘好宝 史素娟 张鸽 李书贵 毛静静 王倩 许迪之
• 来源期刊: 中国烟草学报
• 关键词: 林烟草 NsylCBL10 启动子 GUS活性 组织特异性
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 97-105,120
• 页数: 10页
• 字数: 5952字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16472/j.chinatobacco.2016.434

摘要

[目的]探究林烟草(Nicotiana sylvestris)类钙调神经素B亚基蛋白(Calcineurin B-like protein,CBL)基因家族成员NsylCBL10的启动子在烟草不同生长发育过程及光信号刺激下的活性变化.[方法]克隆NsylCBL 10启动子并初步预测其顺式作用元件;构建NsylCBL 10启动子驱动β-葡萄糖苷酸酶基因(GUS)的融合表达载体并将其转入普通烟草(Nicotiana tabacum),获得转Nsyl CBL1 0pro::GUS的纯合材料;利用所获转基因材料探究NsylCBL 10启动子在种子萌发期、幼苗期和成熟期的组织特异活性和在幼苗下胚轴的光诱导活性.[结果]预测结果表明,NsylCBL10启动子含有与组织特异性和响应光信号、植物激素和胁迫等相关的顺式作用元件;组织化学染色试验表明,NsylCBL 10启动子驱动的GUS基因在种子萌发期主要在子叶节区-根过渡区、根尖表达,子叶伸展期主要在子叶、子叶节区-根过渡区和根尖表达,十字期主要在叶片中表达,成熟期在柱头、成熟的花药、侧根根尖和侧根根基部表达量较高;幼苗下胚轴中,NsylCBLJ0启动子驱动的GUS的基因表达在光下受到抑制,黑暗下被增强.[结论]NsylCBL10启动子活性在烟草不同发育期的组织中呈现动态变化.在烟草分生能力强的部位和成熟期的花器官中其启动活性较强,在幼苗下胚轴中的启动子活性受到光信号的调控.