真核表达质粒pCMV-脂联素的构建及其转染对高糖环境下肾系膜细胞增殖影响的研究

• 作者: 冯敏 吕琦 温俊平 黄国良
• 来源期刊: 中国糖尿病杂志
• 关键词: 真核表达质粒 pCMV-脂联素 肾系膜细胞 转染 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2017,（7）
• 所属期刊栏目: 糖尿病基础研究
• 页码范围: 649-654
• 页数: 6页
• 字数: 4459字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-6187.2017.07.016

摘要

目的 构建pCMV-脂联素(APN)真核表达质粒,观察转染小鼠肾系膜细胞后APN的表达以及对高糖环境下肾系膜细胞增殖的影响. 方法 通过RT-PCR扩增小鼠肾系膜细胞中APN基因片段,经酶切、纯化后与pcDNA3.1质粒连接构建pCMV-APN重组质粒.pCMV-APN重组质粒经酶切鉴定及DNA测序验证后,由脂质体转染将pCMV-APN真核表达质粒转导入肾系膜细胞中,Western blot检测转染后细胞中APN蛋白表达,MTT检测转染后细胞在高糖环境下增殖活性的变化. 结果 真核表达质粒pCMV-APN经酶切、测序鉴定后提示构建成功.转染后肾系膜细胞APN蛋白表达明显增高,且在高糖环境下的增殖活性较空载体转染组明显下降[(0.87±0.06) vs (0.60±0.01),P<0.05]. 结论 成功构建pCMV-APN真核表达质粒,能稳定表达于小鼠肾系膜细胞及抑制高糖的诱导增殖作用,为进一步研究APN的生物学功能奠定理论基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄国良	福建医科大学附属协和医院内分泌科	50	298	8.0	16.0
2	温俊平	福建省立医院内分泌科	17	42	4.0	6.0
3	吕琦	福建省老年医院内分泌科	5	6	2.0	2.0
4	冯敏	福建省老年医院内分泌科	1	0	0.0	0.0