人全长Notch1基因的克隆及其在HEK293 T细胞中的表达

• 作者: 叶健斌 宁云山 李妍 林彦青 胡冰心 邱晓媚
• 来源期刊: 暨南大学学报（自然科学与医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: Notch信号通路 真核表达 Notch1 pCMV6-Entry
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 页码范围: 373-379
• 页数: 7页
• 分类号: Q291
• 字数: 4393字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11778/j.jdxb.2017.05.001

摘要

目的:克隆人全长Notch1基因,构建人全长Notch1/pCMV6-Entry真核重组质粒并在HEK293 T细胞中进行瞬时表达.方法:采用PCR公知不认方法扩增人全长Notch1基因并克隆到真核表达载体pCMV6-Entry中并用限制性内切酶分析和DNA测序鉴定重组质粒.将该重组质粒转染HEK293 T细胞24h后,通过实时荧光定量PCR(q-PCR)和Western blot检测鉴定人全长Notch1的表达.结果:成功构建了人Notch1/pCMV6-Entry重组真核表达质粒,人全长Notch1基因在mRNA和蛋白水平上的表达显著高于pCMV6-Entry载体对照组和HEK293 T细胞对照组.结论:克隆获得人全长Notch1基因并验证在HEK293 T细胞中表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李妍	南方医科大学检验与生物技术学院生物治疗研究所	47	170	6.0	10.0
2	宁云山	南方医科大学检验与生物技术学院生物治疗研究所	29	79	4.0	7.0
3	林彦青	南方医科大学检验与生物技术学院生物治疗研究所	2	8	1.0	2.0
4	邱晓媚		2	5	1.0	2.0
5	叶健斌	南方医科大学检验与生物技术学院生物治疗研究所	3	7	2.0	2.0
6	胡冰心	南方医科大学检验与生物技术学院生物治疗研究所	3	5	1.0	2.0