表达猪Viperin蛋白重组腺病毒的构建及其对PRRSV复制的抑制作用

• 作者: 徐引弟 方剑玉 朱文豪 李海利 王克领 王治方 白献晓 郎利敏 郭小参
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪Viperin蛋白 重组腺病毒 抗病毒活性 猪繁殖与呼吸综合征病毒
• 年，卷（期）: 2017,（9）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 126-131
• 页数: 6页
• 分类号: S855.3
• 字数: 4912字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2017.09.024

摘要

为研究猪Viperin蛋白对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)复制的抑制作用,通过RT-PCR方法扩增猪Viperin基因,并克隆入腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV,经菌液PCR、酶切鉴定后进行测序.将Pme Ⅰ内切酶线性化的重组穿梭载体质粒(pAdTrack-sVIP)电转化大肠杆菌BJ5183,与腺病毒骨架载体pAdEasy-1进行同源重组,提取重组后的腺病毒质粒,经内切酶PacⅠ线性化后转染HEK-293A细胞,装配成完整的病毒粒子rAd-sVIP.重组腺病毒rAd-sVIP感染细胞后,可见绿色荧光蛋白的表达.RT-PCR、Western blot检测结果表明,重组腺病毒rAd-sVIP可正确表达猪Viperin蛋白,且表达的猪Viperin蛋白具有良好的反应原性,对PRRSV的复制具有明显的抑制作用.