乙酸激酶编码基因缺失的L–色氨酸生产菌株的理性构建

• 作者: 张成林 徐庆阳 赵春光 陈宁
• 来源期刊: 天津科技大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 大肠杆菌 L–色氨酸 基因组学 乙酸激酶 代谢流分析
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 食品与生物技术
• 页码范围: 15-20,25
• 页数: 7页
• 分类号: Q815
• 字数: 3687字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13364/j.issn.1672-6510.20160152

摘要

针对L–色氨酸生产菌株(Escherichia coliTRTH)发酵生产L–色氨酸过程中乙酸积累的问题,本文采用基因组学的方法证实了该菌株基因组上存在乙酸激酶编码基因ackA及tdcD的完整基因序列;并通过敲除ackA、tdcD构建出菌株TRTHA(TRTH,ΔackA)、TRTHT(TRTH,ΔtdcD)、TRTHAT(TRTH,ΔackAΔtdcD),进而考察ackA或/和tdcD缺失对L–色氨酸发酵的影响.结果表明:基因ackA或/和tdcD的缺失会使得乙酸积累减少、菌体生物量及其L–色氨酸产量增加,但同时会造成谷氨酸积累量的增加;菌株TRTHA的生物量及L–色氨酸产量均高于TRTHT.利用TRTHAT菌株发酵生产L–色氨酸时,菌体生物量、L–色氨酸产量和糖酸转化率分别为47.48,g/L、40.52,g/L和15.44%,,较TRTH菌株分别提高了6.03%,、7.94%,及7.82%,;乙酸和谷氨酸积累量分别为1.41,g/L、8.58,g/L,较TRTH菌株分别降低了10.19%,、提高了12.15%,.由TRTH与TRTHAT菌株的代谢流分析得知,与出发菌株TRTH相比,TRTHAT菌株的乙酸合成代谢流降低了72.78%,谷氨酸合成代谢流提高了13.13%,,L–色氨酸合成代谢流是TRTH菌株的1.74倍.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈宁	天津科技大学生物工程学院	229	1535	18.0	25.0
2	徐庆阳	天津科技大学生物工程学院	128	690	13.0	19.0
3	张成林	天津科技大学生物工程学院	21	14	2.0	3.0
4	赵春光	天津科技大学生物工程学院	6	65	3.0	6.0