地黄RgDXR基因的克隆及表达分析

• 作者: 俎梦航 朱畇昊 李攀登 董诚明 赵乐
• 来源期刊: 植物生理学报
• 关键词: 地黄 RgDXR基因 生物信息学分析 原核表达 表达分析
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 563-571
• 页数: 9页
• 语种: 中文

摘要

本研究采用RT-PCR法对地黄DXR基因进行克隆,并用生物信息学方法分析其功能结构域、系统进化等;将地黄DXR基因克隆到原核表达载体pET-32a上,使用大肠杆菌BL21菌株进行RgDXR蛋白的原核表达及纯化,实时荧光定量PCR方法分析RgDXR在不同组织、不同内生菌诱导下的表达特性.获得的RgDXR基因cDNA全长为1425 bp,编码474个氨基酸.生物信息学分析发现RgDXR基因编码的蛋白质具有典型的DXR功能结构域,属于植物DXR基因家族.系统进化树分析表明,地黄RgDXR与芝麻亲缘关系最近.荧光定量PCR结果显示,栽培品种'北京3号'根中RgDXR表达量最高.内生真菌诱导实验表明,RgDXR基因的转录水平与梓醇等环烯醚萜类物质的含量成正相关.本研究克隆所得的地黄RgDXR基因属于DXR基因家族,推测其可能与地黄中环烯醚萜类物质的生物合成有关.