高效液相色谱法测定血清卵磷脂胆固醇酰基转移酶活性的建立

• 作者: 曾洁 李红霞 杨睿悦 王思明 王玉 董军 陈文祥
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 卵磷脂胆固醇酰基转移酶 心血管病 高效液相色谱 7-脱氢胆固醇
• 年，卷（期）: 2017,（9）
• 所属期刊栏目: 临床检验技术研究
• 页码范围: 644-648
• 页数: 5页
• 分类号: R446|R541.4
• 字数: 4345字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13602/j.cnki.jcls.2017.09.02

摘要

目的 建立高效液相色谱法(HPLC)测定血清卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)活性的方法,观察LCAT活性与动脉粥样硬化性心血管病(CVD)传统危险因素的关系.方法 选用7-脱氢胆固醇和1,2-二癸酰基甘油-3-磷酸(10∶0 PC)作为LCAT的反应底物,加入LCAT激活肽(LAP642),制备脂质体;在冰水浴中将500μL脂质体与10μL血清混合,37℃温育1h;提取脂质,HPLC测定反应后7-脱氢胆固醇及其酯之比,计算LCAT活性.用所建方法测定120例健康志愿者血清的LCAT活性,分析其与CVD危险因素的关系.结果 7-脱氢胆固醇、10∶0 PC(物质的量的比为1∶8.5)与LAP642组成的脂质体制备简单、性质稳定.当温育时间0～8h、血清量0～ 20 μL时,LCAT活性与变量线性相关;平均批内不精密度(CV)和总CV分别小于1.76％、3.11％.方法比对结果显示,所建方法与ELISA测定的LCAT质量和内源底物法测定的LCAT活性显著正相关(P＜0.01).120例样本LCAT活性与体质量指数(BMI)、三酰甘油(TG)等呈正相关(P＜0.05);与载脂蛋白AⅠ(apoAⅠ)(P＜0.05)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C) (P ＜0.01)等呈负相关.结论 建立了HPLC测定LCAT活性的外源底物法,所建方法简便、精密、可靠,结果不受反应底物影响,为脂代谢机制研究和CVD危险分析提供了新的方法学基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王思明	北京医院国家老年医学中心	3	1	1.0	1.0
2	杨睿悦	北京医院国家老年医学中心	4	1	1.0	1.0
3	李红霞	北京医院国家老年医学中心	5	20	2.0	4.0
4	陈文祥	北京医院国家老年医学中心	14	37	4.0	5.0
5	曾洁	北京医院国家老年医学中心	4	4	1.0	2.0