发展基于活细胞的FlexStation3高通量钙荧光方法及筛选TRPV3通道抑制剂

• 作者: 卫宁宁 孙晓梅 孙晓颖 王克威
• 来源期刊: 中国药学（英文版）
• 学科: 医学
• 关键词: TRPV3通道抑制剂 甲基莲心碱 FlexStation3 全细胞膜片钳 钙离子
• 年，卷（期）: 2017,（9）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 675-683
• 页数: 9页
• 分类号: R962.1
• 语种: 英文

摘要

为了建立高通量筛选TRPV3通道调节剂的方法,本研究利用FlexStation3酶标仪,针对瞬时转染TRPV3通道的HEK293T细胞的密度、Cal-520染料的浓度及染料孵育时间进行了条件优化.结果显示,40 000个细胞/孔、5.0％的Cal-520染料浓度及1.5 h的染料孵育时间为最佳实验条件.应用该筛选方法,筛选并发现来源于睡莲科植物的有效成分甲基莲心碱(neferine)能够抑制TRPV3通道,该抑制作用经全细胞膜片钳实验证实并测得其IC50为24.5±4.1 μM(n=6).对其它TRPV通道成员的选择性电生理学评价结果显示,甲基莲心碱对TRPVl和TRPV4通道无抑制作用.总之,实验数据显示,FlexStation3高通量钙荧光筛选可以用于发现TRPV3以及其他TRP通道的调节剂,筛选发现的天然产物甲基莲心碱可以作为TRPV3通道的工具药研究通道的药理学功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙晓梅		8	2	1.0	1.0
2	王克威		4	10	2.0	3.0
3	卫宁宁		1	0	0.0	0.0
4	孙晓颖		1	0	0.0	0.0