牛病毒性腹泻病毒GSTZ株E1基因原核表达载体的构建及表达

• 作者: 周小凯 周昌娈 柏家林 谢军 马忠仁 马晓霞
• 来源期刊: 西北民族大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 牛病毒性腹泻病毒 E1基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 生物
• 页码范围: 46-51
• 页数: 6页
• 分类号: S851
• 字数: 3935字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-2102.2017.04.011

摘要

为研究牛病毒性腹泻病毒的囊膜糖蛋白E1的抗原性,参考了Oregon C24V BVDV毒株的基因组序列(AF091605.1),并设计一对特异引物(上游引物5'-CCC GGA TCC ATG GCC TCT CCC TAC TGT-3',下游引物5'-GGG CTC GAG TTA CCC TTG TGC TCC TGT T-3'),利用RT-PCR从病毒基因组中扩增E1基因609 bp全长片段,测序结果表明,与C24V株核苷酸同源性达100％.扩增产物经BamH I和Xh0 I双酶切,亚克隆至原核表达载体,双酶切鉴定表明成功构建了重组表达载体pET-32a(+)-E1.重组表达栽体转化BL21 (DE3)宿主菌,IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western-blot检测,成功诱导表达出25ku E1蛋白.实验结果为进一步研究BVDVE1蛋白的功能提供了参考.