MMP9、S100A10基因沉默稳转小鼠细胞系的构建及验证

• 作者: 朱红梅 温海 陈雪雯
• 来源期刊: 中国真菌学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 慢病毒载体 基质金属蛋白酶9 (MMP9) S100A10 b.End3
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 19-22,18
• 页数: 5页
• 分类号: R392.1
• 字数: 3542字
• 语种: 中文

摘要

目的 分别构建小鼠MMP9、S100A10沉默的稳转细胞系,并验证功能.方法 构建能有效干扰S100A10、MMP9表达的慢病毒LV-musMMP9-shRNA、LV-musS100 A10-shRNA,将其转染293T细胞进行包装、扩增及质量检测.将包装好的慢病毒分别转染b.End3,嘌呤霉素筛选稳转细胞系,通过荧光显微镜、RT-qPCR检测对应目的基因表达量,构建稳转细胞系.结果 成功构建有效干扰S100A10、MMP-9表达的稳转细胞系,其滴度分别为1×108 TU/mL、3×108 TU/mL.荧光显微镜检测稳转细胞的荧光表达接近100％;RT-qPCR分别检测MMP9、S100A10基因表达下调率分别为78％、72％.结论 构建有效干扰S100A10、MMP-9表达的稳转细胞系,为控制单一变量直观探究S100A10、MMP-9影响隐球菌穿过血脑屏障的能力等研究奠定了重要基础,为隐球菌性脑炎/脑膜炎的临床治疗靶点研究开辟新的思路.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈雪雯	上海市长征医院皮肤科全军真菌病重点实验室上海市医学真菌分子生物学重点实验室	3	3	1.0	1.0
2	朱红梅	上海市长征医院皮肤科全军真菌病重点实验室上海市医学真菌分子生物学重点实验室	6	8	1.0	2.0
3	温海	上海市长征医院皮肤科全军真菌病重点实验室上海市医学真菌分子生物学重点实验室	6	12	2.0	3.0