马铃薯A病毒重组CP多克隆抗体的制备及其在DAS-ELISA检测中的应用

• 作者: 乔利仙 宋志成 李广存 杨煜 王晶珊 费新敏 郭宝太
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 马铃薯A病毒 重组CP 多克隆抗体 酶标记抗体 DAS-ELISA检测
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 页码范围: 41-46
• 页数: 6页
• 分类号: S432.4+1|Q782|S532
• 字数: 4963字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7668/hbnxb.2017.01.007

摘要

利用重组CP作抗原制备出马铃薯A病毒的多克隆抗体,并将其用于DAS-ELISA检测.以pET22b(+)为起始载体,构建了PVA-CP基因的原核表达载体pET22b-ACP,重组菌BL21(pET22b-ACP)经IPTG诱导表达出了分子量为30 kDa的特异性重组CP.利用高纯度重组CP为抗原免疫家兔,制备出了效价为1:512 k的抗血清.以PVA重组CP为抗原,用间接ELISA与直接ELISA分别测定重组CP纯化抗体(IgG)及其碱性磷酸酶标记物(IgG-AP)的活性,用DAS-ELISA测定2种抗体的活性,目测及OD值测定结果表明3种ELISA测定反应都呈阳性.以PVA病毒阳性标准物为抗原,在上述3种ELISA测定中也呈阳性反应,重组CP多克隆抗体及其酶标抗体与PVA有较强的反应信号.利用重组CP制备的多克隆抗体及其酶标抗体达到了马铃薯A病毒DAS-ELISA检测的要求.