肠道病毒71型VP1抗原表位多肽疫苗的实验研究

• 作者: 向云凤 宋惠玲 李青 汤正珍 苟恩进 韩允 顾胜利 黄波
• 来源期刊: 中国循证儿科杂志
• 关键词: 手足口病 肠道病毒EV71 结构蛋白VP1 多肽疫苗 贵州
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 383-387
• 页数: 5页
• 字数: 3813字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-5501.2017.05.013

摘要

目的 根据贵州省手足口病患儿肠道病毒71型(EV71)分离株的VP1结构蛋白序列研制多肽疫苗并研究其对小鼠的免疫保护作用.方法 2013年3月1日至2015年12月31日从贵州省手足口病患儿的咽拭子样本中分离到17株EV71毒株,其VP1氨基酸序列一致(共297个氨基酸),据此设计并合成多肽片段(除最后一段为27个氨基酸外,其余均为20个氨基酸);用感染EV71的手足口病病愈患儿的阳性血清,通过间接ELISA法筛选出免疫原性较好的多肽片段,制成多肽疫苗;用多肽疫苗免疫ICR健康雌鼠,并设未免疫的对照(Con);将雌鼠的子代小鼠随机分为注射和不注射EV71病毒颗粒的2个亚组;注射病毒2d后处死所有小鼠,分别取小鼠的骨骼肌、小肠和脑组织,通过RT-PCR检测病毒感染情况,同时HE染色后在显微镜下观察病理改变.结果 共设计并合成19段含交叉序列的多肽片段,从中筛选出3段免疫原性较好的(P2:VSRALTHALPAPTGQNTQVS;P4:ALQAAEIGASSNASDESMIE;P8:YANWDIDITGYAQMRRKVEL),制成多肽疫苗并免疫雌鼠,取雌鼠的子代小鼠进行后续试验.RT-PCR结果显示,各感染病毒亚组的骨骼肌、小肠和脑组织中均能检测到EV71病毒,而未感染病毒亚组均检测不到;病理结果显示,未接种多肽疫苗母鼠的子代小鼠在感染EV71病毒后,骨骼肌、小肠和脑组织均出现明显的炎性改变;接种多肽疫苗母鼠的子代小鼠骨骼肌、小肠和脑组织的炎性改变明显减轻,3种多肽疫苗对EV71所致炎症的改善作用无明显差异;接种多肽疫苗母鼠的未注射病毒亚组子代小鼠骨骼肌、小肠和脑组织中均未检测到EV71病毒,也未观察到明显的炎性改变.结论 本研究成功制备VP1抗原表位多肽疫苗并在动物实验中证实了其有效性和安全性,可为今后相关疫苗的研制提供方法学借鉴.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李青	遵义医学院第三附属医院儿童重症医学科	17	121	5.0	11.0
2	顾胜利	遵义医学院第三附属医院儿童重症医学科	2	17	2.0	2.0
3	韩允	遵义医学院第三附属医院儿童重症医学科	2	17	2.0	2.0
4	汤正珍	遵义医学院第三附属医院儿童重症医学科	3	17	2.0	3.0
5	向云凤		1	2	1.0	1.0
6	宋惠玲		2	4	2.0	2.0
7	苟恩进		1	2	1.0	1.0