肠道病毒71型外壳蛋白VP1在大肠杆菌的表达和纯化

• 作者: 吴亚安 肖承荣 蔡陈珣 谢端 赵晓蓉 邓丽芬 陈端萍 龚雨婷
• 来源期刊: 广东药学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 肠道病毒71型 VP1 原核表达 纯化
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 医学研究
• 页码范围: 556-559
• 页数: 4页
• 分类号: R373.2
• 字数: 3388字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-8783.2012.05.023

摘要

目的 分析重组肠道病毒71型外壳蛋白VP1 (EV71VP1)在大肠杆菌的表达及其部位,纯化重组蛋白VP1,为后续制备抗VP1单克隆抗体奠定基础.方法 采用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导VP1在质粒转化菌BL21中的表达；用Ni-NTA亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,并用SDS-PAGE和Western blot分析VP1的表达形式和抗原性；优化EV71 VP1原核表达条件.结果 SDS-PAGE检测结果表明重组蛋白主要以包涵体形式存在,纯化后的VP1为一单一条带,相对分子质量约36 000,与预期大小相符；Western blot检测证实该蛋白能分别与兔抗EV71外膜蛋白和兔抗His-tag多克隆抗体发生特异性结合,其最佳表达条件为37℃,1.25 mmol/L IPTG诱导4h.结论 原核表达了EV71 VP1,经纯化复性后VP1具有良好的抗原性,为后续工作奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵晓蓉	广东药学院公共卫生学院	10	28	3.0	5.0
3	吴亚安	广东药学院公共卫生学院	1	0	0.0	0.0
4	邓丽芬	广东药学院公共卫生学院	1	0	0.0	0.0
5	龚雨婷	广东药学院公共卫生学院	1	0	0.0	0.0
6	陈端萍	广东药学院公共卫生学院	1	0	0.0	0.0
7	谢端	广东药学院公共卫生学院	1	0	0.0	0.0
8	肖承荣	广东药学院公共卫生学院	1	0	0.0	0.0
9	蔡陈珣	广东药学院公共卫生学院	1	0	0.0	0.0