EV71与CB3病毒VP1融合蛋白的构建表达与抗原性初步评价

• 作者: 刘雄 屠伟 房华丽 李涛 王慧 王琴 田仁茂 罗森 高翔
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 肠道病毒71型 柯萨奇B3病毒 外壳蛋白VP1 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 583-586
• 页数: 4页
• 分类号: R373.2|Q939.9
• 字数: 3788字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建pET-22b-ECVP1表达载体,在大肠杆菌中诱导表达肠道病毒71型(EV71)及柯萨奇B3型(CB3)病毒VP1融合蛋白(ECVP1),并鉴定其抗原性.方法 利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法分别从EV71与CB3病毒基因组中扩增得到外壳蛋白VP1基因,经重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法拼接构建重组融合蛋白基因(ecvp1),将该片段连接到pET-22b表达载体上,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达融合蛋白,经Western blot鉴定其抗原性.结果 pET-22b-ECVP1表达载体构建成功,融合蛋白相对分子量约为65 ku,Western blot分析表明,该融合蛋白能被抗EV71及抗CB3抗体特异识别.结论 成功构建pET-22b-ECVP1表达质粒并诱导ECVP1融合蛋白表达,且融合蛋白具有良好的抗原性.