A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的表达·纯化及活性检测李

• 作者: 丛国正 常惠芸 李菁 林彤 独军政 邵军军 高闪电
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: A型口蹄疫病毒 结构蛋白VP1 表达及纯化
• 年，卷（期）: 2010,（10）
• 所属期刊栏目: 动物与饲料科学
• 页码范围: 5248-5250
• 分类号: S852.65
• 字数: 3183字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2010.10.059

摘要

[目的]表达口蹄疫病毒结构蛋白VP1,并对其进行纯化和相关活性的检测.[方法]以A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1重组质粒pGEM-VP1为模板,用特异性表达引物扩增其编码区,经酶切后与pGEX-4T-1、pPROExHTb等原核表达载体相连,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS表达菌株,经IPTG诱导表达,以实现VP1蛋白的表达,SDS-PAGE鉴定融合蛋白的表达并对2种载体重组菌进行超声裂解,取上清和沉淀电泳,用金属螯合亲合层析法对His-VP1进行纯化.[结果]SDS-PAGE电泳分析显示pPRO-VP1诱导后目的条带为33 ku,与预期结果相符;目的蛋白纯化后,在电泳图片上显示较为清晰的单一条带;His-VP1可与A型口蹄疫病毒豚鼠灭活阳性血清发生特异性的反应.[结论]表达及纯化了具有高特异性的A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1,为深入研究结构蛋白VP1在口蹄疫病毒致病机制中的作用奠定了基础.