口蹄疫病毒VP1蛋白可溶性表达标签筛选

• 作者: 李赛赛 申欢欢 舒静超 郭豫杰
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 口蹄疫病毒 VP1蛋白 可溶性 融合标签
• 年，卷（期）: 2016,（9）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 114-119
• 页数: 6页
• 分类号: S855.3
• 字数: 4376字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2016.09.023

摘要

为了提高口蹄疫病毒VP1蛋白的可溶性表达,根据A型口蹄疫病毒核酸序列设计并合成了口蹄疫病毒VP1片段,将其克隆到pET21b(+)载体上,设计1对通用引物扩增10个融合标签Gri-fin、GST、NusA、SUMO、Thioredoxin、ProteinG、γ-crystallin、ArsC、PpiB、MBP,并分别将扩增的融合标签与VP1连接构建重组质粒,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),0.5 mmol/L IPTG诱导其表达.SDS-PAGE结果表明,MBP、Grifin和GST能够促进口蹄疫病毒VP1蛋白的可溶性表达,其中MBP与VP1融合表达蛋白可溶部分占60％;Western blot鉴定分析结果显示,小鼠抗His标签单克隆抗体能识别表达的重组蛋白.表明成功表达了具有免疫学活性的融合蛋白MBP-VP1.