黄秋葵LCYE基因的克隆与表达分析

• 作者: 刘建汀 朱海生 李永平 温庆放 陈敏氡
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 黄秋葵 叶黄素 番茄红素ε-环化酶(LCYE) 超高效液相色谱法(UPLC)
• 年，卷（期）: 2017,（10）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 1600-1611
• 页数: 12页
• 分类号: S649
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2017.10.005

摘要

ε-番茄红素环化酶(lycopene epsilon-cyclase,LCYE)是参与类胡萝卜素合成的关键酶,在类胡萝卜素合成中发挥着重要作用.为了探究黄秋葵(Hibiscus esculentus)中LCYE基因的功能,本研究成功克隆了黄秋葵类胡萝卜素合成途径中下游LCYE,其cDNA全长1 845 bp,具有l 605个碱基的完整开放阅读框(ORE),编码534个氨基酸,理论分子量(Mw)为59.73 kD,等电点(pI)为6.22.黄秋葵LCYE与亚洲棉(Gossypium arboretum)、可可(Theobroma cacao)及麻风树(Jatropha curcas)同源蛋白的相似性均在80％以上,具高度的保守性,将基因命名为HyLCYE,GenBank登录号为:KX257999.荧光定量分析表明,LCYE在黄秋葵成熟叶中表达最高,果实发育中以花后3d高表达.应用超高效液相色谱法(ultra performance liquid chromatography,UPLC)对叶黄素含量进行分析,在不同发育时期的叶中,成熟叶中叶黄素含量最高;在果实中,以花后3d的果实含量最高.结果表明,HyLCYE基因表达与叶黄素含量成正相关.不同基因型秋葵品种同一时期的类胡萝卜素以绿色品种最高,红色秋葵品种次之,白色秋葵品种总含量最低.该实验结果为进一步开发利用黄秋葵提供了科学依据.