miR-137过表达慢病毒的包装和鉴定

• 作者: 律东 李明颖 林举达 梁春梅 殷静雯 罗旭东 马国达
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: miR-137 慢病毒 HEK293T细胞 绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 694-697,前插1
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 2666字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13481/j.1671-587x.20170406

摘要

目的:构建miR-137过表达慢病毒载体并进一步包装慢病毒,探讨miR-137在HEK293T细胞中的感染效率和表达水平.方法:化学合成miR-137序列并克隆到慢病毒载体GV209,得到并鉴定含有目的片段的重组质粒,采用Lipofectamine 2000共转miR-137重组质粒与慢病毒辅助包装质粒到HEK293T细胞中生产慢病毒.以感染复数(MOI)值为40感染HEK293T细胞48 h后,荧光显微镜下观察细胞中绿色荧光蛋白(GFP)的表达,采用荧光定量PCR法检测HEK293T细胞中miR-137的表达水平.结果:测序结果,目的基因序列与GenBank公布的miR-137基因序列完全一致.在感染的HEK293T细胞中观察到GFP的表达.过表达慢病毒感染细胞中miR-137表达水平是对照细胞的12.74倍.结论:成功包装miR-137过表达慢病毒,并可高效感染HEK293T细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	律东	广东医科大学附属医院精神心理科	12	43	4.0	6.0
2	林举达	广东医科大学附属医院精神心理科	19	45	4.0	6.0
3	李明颖	广东医科大学附属医院精神心理科	4	13	1.0	3.0
4	罗旭东	广东医科大学附属医院精神心理科	12	14	3.0	3.0
5	殷静雯	广东医科大学附属医院精神心理科	6	6	1.0	2.0
6	梁春梅	广东医科大学神经病学研究所	2	1	1.0	1.0
7	马国达	广东医科大学神经病学研究所	3	1	1.0	1.0