mTOR信号通路在17-DMAG克服EML4-ALK阳性肺癌细胞株H3122对alectinib耐药中的作用机制研究

• 作者: 周韶璋 宋向群 李娅妮 梁柳丹
• 来源期刊: 中国癌症防治杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肺肿瘤 EML4-ALK融合基因 H3122细胞株 Alectinib 17-DMAG mTOR信号通路
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 111-118
• 页数: 8页
• 分类号: R734.2
• 字数: 5436字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-5671.2017.02.06

摘要

目的 观察mTOR信号通路在17-DMAG克服旁路信号通路激活诱导棘皮动物微管相关蛋白样4与间变性淋巴瘤激酶(echinoderm microtubule-associated protein like 4-anaplastic lymphoma kinase,EML4-ALK)融合基因阳性肺癌细胞株H3122(以下简称“H3122细胞”)对alectinib耐药中的变化,并探讨其内在的调控机制.方法 加入100 ng/mL转化生长因子α(transforming growth factor-α,TGF-α)和100 ng/mL表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)诱导H3122细胞对alectinib耐药,观察加入17-DMAG后上述耐药能否被克服.采用CCK-8法检测不同处理方式下H3122细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质免疫印迹(Western blot)技术检测不同处理方式下细胞中ALK、EGFR及其磷酸化蛋白的表达,观察其下游mTOR信号通路关键蛋白及活化水平的表达情况.结果 alectinib作用72 h后H3122细胞增殖率随药物浓度升高而下降,IC50为0.042 μmol/L;联合TGF-α或EGF后H3122细胞对alectinib耐药,IC50远大于10μmol/L;单药17-DMAG处理后H3122细胞增殖率随药物浓度升高而下降,IC50为0.245 μmol/L;联合TGF-α或EGF后H3122细胞增殖率亦被17-DMAG抑制,且呈剂量依赖性,IC50分别为0.251 μmol/L和0.301 μmol/L.经0.05 μmol/L alectinib作用72 h后H3122细胞凋亡率为(30.01±0.92)％,alectinib联合TGF-α或EGF后细胞凋亡率分别为(6.36±0.14)％和(6.13±0.21)％,显著低于alectinib单药处理(P＜0.001);经0.3 μmol/L 17-DMAG单药或联合TGF-α、EGF作用72 h后H3122细胞凋亡率分别为(28.37±1.75)％、(26.69±1.2)％和(26.62±0.72)％,差异无统计学意义(P＞0.05).alectinib可抑制H3122细胞中p-ALK、p-mTOR的表达,也可抑制mTOR上、下游关键蛋白的活化状态;EGF可明显增加细胞中p-EGFR、p-mTOR及mTOR上、下游关键蛋白的活化水平表达;alectinib可抑制p-ALK表达,但联合EGF后不能抑制mTOR及mTOR上、下游关键蛋白活化水平的表达;即使联合EGF后,17-DMAG亦能抑制H3122细胞中ALK、EGFR、mTOR信号通路蛋白及其活化状态蛋白的表达.结论 旁路信号通路激活介导EML4-ALK融合基因阳性肺癌细胞株H3122对alectinib耐药的方式具有可行性,mTOR信号通路在17-DMAG克服旁路信号通路激活引起alectinib的获得性耐药过程中有一定作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁柳丹	530021南宁 广西医科大学附属肿瘤医院呼吸肿瘤内科	3	6	2.0	2.0
5	李娅妮	530021南宁 广西医科大学附属肿瘤医院呼吸肿瘤内科	1	0	0.0	0.0