旁路信号通路激活介导的EML4-ALK融合基因阳性肺癌细胞株H3122对alectinib继发耐药的研究

• 作者: 周韶璋 宋向群 李娅妮 梁柳丹 陈燕琼
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: EML4-ALK融合基因 Alectinib 肝细胞生长因子 表皮生长因子受体 耐药性
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 769-775
• 页数: 7页
• 分类号: R730.23
• 字数: 5045字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2017.05.001

摘要

目的:本研究旨在探讨肝细胞生长因子(HGF)、表皮生长因子(EGF)及转化生长因子α(TGF-α)是否以旁路激活的方式诱导EML4-ALK融合基因阳性肺癌细胞株H3122对alectinib的耐药,并进一步探讨旁路信号激活在alectinib耐药中的作用.方法:用不同浓度的alectinib、克唑替尼(crizotinib)、17-DMAG或(和)HGF(50 μg/L)、EGF(100 μg/L)、TGF-α(100 μg/L)处理EML4-ALK阳性肺癌细胞株H3122,采用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,应用Western blot技术检测细胞中ALK、c-Met、EGFR及相应磷酸化蛋白的表达,观察其下游通路关键蛋白AKT、ERK、p-AKT和p-ERK水平.结果:Alectinib作用72 h后,H3122细胞株的活力随着alectinib药物浓度的增加而逐渐下降,呈剂量依赖性.HGF、EGF和TGF-α诱导后,alectinib抑制H3122细胞的生长曲线往右移,HGF、EGF和TGF-α处理能够降低alectinib对肺癌细胞活力的抑制作用.0.05 μmol/L alectinib作用H3122细胞株48 h后的凋亡率为(20.12±1.36)%,而alectinib联合HGF、EGF和TGF-α后的凋亡率分别为(7.85±1.03)%、(5.60±0.79)%和(4.58±1.00)%,显著低于alectinib单药处理(P<0.05).Alectinib单药成功抑制p-ALK及其下游信号通路,HGF明显增加细胞中p-Met及其下游p-AKT、p-ERK的蛋白水平,EGF和TGF-α明显增加细胞中p-EGFR及其下游p-AKT、p-ERK的表达,alectinib抑制p-ALK,但不能抑制HGF、EGF和TGF-α诱导的p-AKT和p-ERK的蛋白表达.此外,联合应用crizotinib和17-DMAG可以抑制因HGF和EGFR配体而导致的H3122耐药细胞的活力.结论:HGF、EGF和TGF-α可通过旁路激活的方式诱导EML4-ALK阳性肺癌细胞H3122对alectinib耐药,其机制可能与HGF激活c-Met磷酸化、EGF和TGF-α激活EGFR磷酸化有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋向群	广西医科大学附属肿瘤医院呼吸肿瘤内科	68	280	8.0	11.0
2	周韶璋	广西医科大学附属肿瘤医院呼吸肿瘤内科	31	150	6.0	10.0
3	陈燕琼	广西医科大学研究生院	3	4	1.0	2.0
4	梁柳丹	广西医科大学研究生院	3	6	2.0	2.0
5	李娅妮	广西医科大学研究生院	3	8	2.0	2.0