雷公藤贝壳杉烯酸氧化酶基因的全长cDNA克隆与表达分析

• 作者: 关红雨 周家伟 张逸风 胡添源 苏平 高伟 黄璐琦
• 来源期刊: 中国中药杂志
• 关键词: 雷公藤 贝壳杉烯酸氧化酶(KAO) 克隆 生物信息学分析 表达分析
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 资源与鉴定
• 页码范围: 88-93
• 页数: 6页
• 语种: 中文

摘要

贝壳杉烯酸氧化酶(kaurenoic acid oxidase)是二萜赤霉素生物合成途径上的关键酶,参与植物生长发育等重要生物学过程.该文根据雷公藤转录组数据设计特异性引物,采用PCR技术克隆得到贝壳杉烯酸氧化酶全长cDNA序列,并进行生物信息学分析;使用实时定量PCR(qRT-PCR)研究基因的诱导表达水平.克隆得到TwKAO长度为1 874 bp,编码487个氨基酸,蛋白相对分子质量56.02 kDa,理论等电点8.89;经茉莉酸甲酯(MeJA)诱导后,TwKAO基因相对表达量在12 h达到峰值;经植株组织表达分析证实,TwKAO基因在雷公藤的叶中表达量最高,根中最低.该研究首次克隆得到雷公藤KAO基因,并分析其mRNA表达特征,为深入研究雷公藤生长发育以及萜类活性成分次生代谢研究奠定基础.