猪戊型肝炎病毒SYBR Green Ⅱ荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用

• 作者: 徐志文 朱玲 李小璟 李幽幽 毛汐语 邓益超 龚双燕
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 猪戊型肝炎病毒 SYBR GreenⅡ 荧光定量RT-PCR
• 年，卷（期）: 2017,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1002-1006,1017
• 页数: 6页
• 分类号: R373.2
• 字数: 4000字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2017.11.010

摘要

目的 建立一种快速检测猪戊型肝炎病毒(HEV)的方法.方法 针对HEVORF2基因保守序列设计1对引物,基于SYBR GreenⅡ染料,建立了检测HEV的实时荧光定量RT-PCR方法.结果 该方法只能对猪戊型肝炎病毒检测到荧光,对猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪流行性腹泻病毒、猪嵴病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒均不能检测到荧光信号,特异性好;检测HEV时,在4.10×102～4.10×108拷贝/μL内具有良好的线性关系,灵敏度可以达到1.00×102拷贝/μL,扩增相关系数为0.996,扩增产物的熔解温度为84.0℃±0.1℃,该检测方法组内变异系数为0.83％～0.94％,组间变异系数为0.83％～0.94％,重复性较好.利用该方法对临床61份来自四川各地的猪肠内容物进行检测,检出9份阳性,且与常规PCR检测方法的阳性符合率为100％.结论 建立的针对HEV的荧光定量RT-PCR有效可行,对HEV的临床检测和进一步研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱玲	四川农业大学动物医学院	151	499	13.0	17.0
5	李幽幽	四川农业大学动物医学院	5	6	1.0	2.0
6	龚双燕	四川农业大学动物医学院	7	11	2.0	3.0
7	李小璟	四川农业大学动物医学院	7	11	2.0	3.0
8	毛汐语	四川农业大学动物医学院	6	14	2.0	3.0
9	邓益超	四川农业大学动物医学院	5	5	1.0	2.0