Let-7a负性调控人肾上皮细胞293T中UHRF1基因的表达

• 作者: 孙艳 张政 彭惠民 彭睿 文利 武天慧
• 来源期刊: 西南大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 微RNA UHRF1 基因表达
• 年，卷（期）: 2017,（7）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 77-83
• 页数: 7页
• 分类号: Q813
• 语种: 中文
• DOI: 10.13718/j.cnki.xdzk.2017.07.012

摘要

目的: 探讨人肾上皮细胞293T中let-7a对靶基因UHRF1的负性调控作用. 方法: 运用生物信息学技术对let-7a靶基因进行预测和分析. 构建含有 UHRF1 3`UTR 全长的野生型(pmiR-RB-UHRF1-3`UTR-wt)和突变型荧光素酶报告质粒(pmiR-RB-UHRF1-3`UTR-mut), 分别将pmiR-RB-UHRF1-3`UTR-wt,pmiR-RB-UHRF1-3`UTR-mut,pmiR-RB-REPORT vector与let-7a mimics或mimics control共转染293T细胞, 双荧光素酶报告系统检测转染后293T 细胞的荧光素酶表达水平. 293T细胞分别转染let-7a mimics和inhibitor, western blot和real-time RT PCR检测UHRF1基因的表达. 结果: 生物信息学结果显示let-7a有48个预测靶基因, 包括UHRF1,HMGA2,MAPK6 等, 主要涉及microRNA在肿瘤、 细胞周期、 PI3K-AKT、 p53等信号通路. 其中UHRF1 3`UTR 含有一个let-7a的结合位点, 且在多个物种中呈高度保守. 进一步双荧光素酶检测发现, 共转染let-7a mimics和pmiR-RB-UHRF1-3`UTR-wt的 293T细胞荧光素酶活性显著降低(p<0.01). Western blot 和real-time RT PCR结果显示转染let-7a mimics的293T细胞 UHRF1表达降低, 而转染let-7a inhibitor的293T细胞UHRF1表达增高. 结论: 人肾上皮细胞293T中let-7a能通过与UHRF13`UTR靶向结合, 负性调控UHRF1的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭惠民	重庆医科大学实验教学中心	78	428	10.0	15.0
2	文利	重庆医科大学细胞生物学及遗传学教研室	7	22	3.0	4.0
3	张政	重庆医科大学细胞生物学及遗传学教研室	39	214	7.0	13.0
4	彭睿	重庆医科大学生物信息学教研室	21	40	5.0	5.0
5	孙艳	重庆医科大学细胞生物学及遗传学教研室	22	48	5.0	6.0
6	武天慧	重庆医科大学细胞生物学及遗传学教研室	3	6	2.0	2.0