落葵皱缩花叶病毒CP基因的原核表达及多克隆抗血清的制备

• 作者: 代瑾然 任龙辉 张鹏远 李小琴 王建光 陈穗云
• 来源期刊: 园艺学报
• 学科: 农学
• 关键词: 落葵皱缩花叶病毒 紫茉莉 cp基因 多克隆抗血清 ID-ELISA 蛋白质印迹法
• 年，卷（期）: 2017,（10）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 2001-2007
• 页数: 7页
• 分类号: S681.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.16420/j.issn.0513-353x.2016-0826

摘要

以感病紫茉莉叶片为材料,采用RT-PCR方法克隆落葵皱缩花叶病毒(Basella rugose mosaic virus,BaRMV)的外壳蛋白(coat protein,CP)基因,并构建pET30a-BaRMV-cp原核表达载体.将原核表达载体转化大肠杆菌[Rosetta(DE3)PlysS],成功诱导表达得到大小约为40.0 kD的与预期大小相符的融合蛋白(His-CP).SDS-PAGE电泳完毕后用0.25 mol·L-1的KC1溶液染色,将目的蛋白切胶纯化后免疫新西兰大白兔,制备抗血清.间接酶联免疫吸附法(ID-ELISA)检测该抗体的效价为1∶16 000,Western-blotting分析表明该抗体具有很强的特异性.对野外感病紫茉莉和实验室内接种发病本氏烟检测结果也表明,所制备的抗体具有良好的特异性,可用于大规模样品检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张鹏远	云南大学生命科学学院	3	3	1.0	1.0
3	王建光	云南大学生命科学学院	21	89	6.0	7.0
4	陈穗云	云南大学生命科学学院	38	236	8.0	13.0
5	代瑾然	云南大学生命科学学院	11	62	5.0	7.0
6	李小琴	云南大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0
9	任龙辉	云南大学生命科学学院	2	2	1.0	1.0