诱导多能干细胞培养中饲养层制备的条件优化

• 作者: 刘俊晓 王孟丽
• 来源期刊: 中国优生与遗传杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 小鼠胚胎成纤维细胞 诱导多能干细胞 饲养层 丝裂霉素C
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 细胞遗传学与染色体疾病
• 页码范围: 69-70,90
• 页数: 3页
• 分类号: R-33
• 语种: 中文

摘要

目的 建立分离培养小鼠胚胎成纤维细胞(Mouse embryonic fibroblast MEF)的体系,探讨诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cell,iPSC)培养所需饲养层的最佳制备方法,制备高质量的IPSC饲养层细胞.方法 采用胰蛋白酶消化法,将昆明小鼠胚胎制成细胞悬液接种培养.用不同浓度的丝裂霉素C处理MEF细胞制备饲养层,观察处理后的细胞活力及有无再增殖现象,在制备的饲养层细胞上接种IPS细胞,观察各组IPS细胞生长状态.结果 采用0.0625％胰蛋白酶消化孕12.5-14.5d雌鼠胚胎组织获得高活力的MEF细胞,用15μg/ml的丝裂霉素C处理后MEF细胞无明显增值,细胞活力在90％以上,其IPS细胞生长状况最好,效果最佳.结论 该方法可获得高活力的MEF细胞.15μg/ml的丝裂霉素C处理1.5h后的MEF细胞制成的饲养层最适于IPS细胞生长.