越桔ISSR-PCR反应体系建立与优化

• 作者: 李凌 谌月 鲁艳
• 来源期刊: 西南大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 越桔 简单序列重复区间(ISSR) 正交设计 直观分析 方差分析
• 年，卷（期）: 2017,（9）
• 所属期刊栏目: 农业科学
• 页码范围: 26-33
• 页数: 8页
• 分类号: S663.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.13718/j.cnki.xdzk.2017.09.005

摘要

以改良CTAB法提取越桔(Vaccinium Linn.)品种薄雾DNA为材料,采用正交设计L16(4 5)袁探讨了Tag酶;Mg2+;DNA;dntps及引物浓度5个主要因素对越桔ISSR-PCR扩增反应的影响,通过直观分析和方差分析结合,建立了越桔ISSR-PCR(20 μL)最佳反应体系,各组分的浓度为:Tag酶0.75 U,Mg2+1.875 mmol/L,DNA 0.8 mmol/L,dntp 0.1 mmol/L,引物0.2 μmol/L.在此基础上探讨了引物UBC835的最佳退火温度、循环次数和延伸时间,结果分别为54.2℃、35次、60s.选用两个引物对21份越桔资源进行ISSR扩增,结果显示优化的体系稳定性较高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李凌	西南大学园艺园林学院	43	315	11.0	15.0
2	谌月	西南大学园艺园林学院	2	8	1.0	2.0
3	鲁艳	西南大学园艺园林学院	2	8	1.0	2.0