禾谷镰刀菌肌球蛋白(Myosin Ⅰ)生物信息学分析及原核表达与纯化

• 作者: 王健力 迟梦宇 黄金光
• 来源期刊: 青岛农业大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 禾谷镰刀菌 肌球蛋白(Myosin Ⅰ) 生物信息学分析 原核表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 111-118
• 页数: 8页
• 分类号: S432.44
• 字数: 4950字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/J.ISSN.1674-148X.2018.02.006

摘要

肌球蛋白(MyosinⅠ)是新型杀菌剂氰烯菌酯的靶标蛋白,为探究禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)中MyosinⅠ的三维结构及其与氰烯菌酯的互作机制,进一步阐释禾谷镰刀菌对氰烯菌酯潜在的抗性机理,本研究采用生物信息学方法对Myosin Ⅰ氨基酸序列进行分析,结果表明:该蛋白分子量大小为134.9 ku,等电点为9.47,不具有信号肽,属非分泌型蛋白,无跨膜区,是亲水性蛋白,具有MYSc保守结构域.并采用结构生物学的方法,以禾谷镰刀菌(F.graminearum)cDNA为模板,根据Myosin Ⅰ重要功能域序列设计特异性引物进行PCR扩增,克隆了Myosin Ⅰ重要功能域基因并构建了三个功能域蛋白表达载体pHAT2-Myosin Ⅰ 39-720,pETM20—Myosin Ⅰ39-720,pETM30-Myosin Ⅰ39-720,将重组表达载体转化到大肠杆菌BL21(BE3)中,并利用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达,结果表明:主要功能域蛋白在大肠杆菌中表达,但主要以包涵体的形式存在.对该蛋白的生物信息学分析及表达纯化为其结构功能的分析及其与氰烯菌酯互作机制的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王健力		4	3	1.0	1.0