利用CRISPR/Cas9技术构建FARS2基因定点突变的大鼠模型

• 作者: 张勇 李晨浩 李辉 杨行 杨颖 王国霞 车凤玉
• 来源期刊: 神经解剖学杂志
• 关键词: CRISPR/Cas9 FARS2 sgRNA 遗传性痉挛性截瘫 基因敲除大鼠
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 原著
• 页码范围: 737-741
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.16557/j.cnki.1000-7547.2018.06.015

摘要

目的:利用CRISPR/Cas9技术构建FARS2基因特定位点突变的大鼠模型.方法:根据FARS2基因序列,设计FARS2基因特异性的单链向导RNA(sgRNA)引物序列并克隆入pU57-T7-GDNA载体.利用T7RNA聚合酶体外转录sgRNA和Cas9 mRNA.将体外转录的sgRNA/Cas9 mRNA显微注射入SD大鼠受精卵,通过PCR和基因测序对FARS2基因特定位点突变进行检测和鉴定.繁育FARS2基因敲除大鼠并分析后代突变情况.结果:基因测序证实成功构建表达sgRNA载体,成功将sgRNA和Cas9 mRNA直接注射人大鼠受精卵.基因测序鉴定获得5只F0代初建鼠.DNA测序结果证实5号大鼠(ID#5)发生了gac＞ tac突变,该突变并可遗传至子代大鼠.结论:利用CRISPR/Cas9技术成功制备FARS2基因定点突变的大鼠模型,为进一步研究FARS2的功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨颖		6	1	1.0	1.0
2	王国霞	西安市儿童医院儿科疾病研究所	8	5	1.0	2.0
3	车凤玉	西安市儿童医院儿科疾病研究所	6	1	1.0	1.0
4	张勇	空军军医大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室	7	7	1.0	2.0
5	杨行	空军军医大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室	3	1	1.0	1.0
6	李晨浩	空军军医大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室	4	1	1.0	1.0
7	李辉	空军军医大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室	7	2	1.0	1.0