枝状枝孢霉MD2的Unigene A03231的克隆及原核表达分析

• 作者: 刘盼 周兰 宋发军 席晓圆 张鹏 德格 柯友胜
• 来源期刊: 中南民族大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 枝状枝孢霉 紫杉醇 基因 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 35-40
• 页数: 6页
• 分类号: Q36
• 字数: 4388字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-4321.2018.01.008

摘要

为研究真菌紫杉醇合成相关基因的功能,从产紫杉醇真菌枝状枝孢霉MD2中克隆了Unigene A03231的DNA和cDNA全长序列(918 bp).结果表明:该基因不含内含子,其编码产物含305个氨基酸,与短链脱氢酶/还原酶一致性为64%,预测蛋白分子量为33071.5 Da,不存在信号肽,含有2个跨膜结构.Unigene A03231以单拷贝形式存在于基因组,在0~30 h内其表达水平随茉莉酸甲酯诱导表现为先升高后降低.构建了该基因的原核表达菌株,初步优化了其在大肠杆菌BL21中的诱导表达条件为:诱导温度28℃,IPTG浓度0.6 mmol/L,诱导时间8 h.为深入分析该基因的催化功能奠定了基础.