枝状枝孢霉MD2的候选基因A00981的克隆及转基因菌株的构建

• 作者: 刘盼 周兰 宋发军 张鹏 李浩东 甘喆 裴婷
• 来源期刊: 中南民族大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 枝状枝孢霉MD2 紫杉醇 基因克隆 转基因菌株
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 45-49
• 页数: 5页
• 分类号: Q36
• 字数: 2738字
• 语种: 中文
• DOI: 10.12130/znmdzk.20190108

摘要

目的:为揭示真菌紫杉醇合成分子机制.方法:克隆了产紫杉醇内生真菌枝状枝孢霉MD2的候选基因A00981,该基因DNA和cDNA序列分别为969 bp和894 bp;其编码蛋白含有298个氨基酸、无跨膜结构和信号肽,与酰基辅酶A脱氢酶(ACAD)具有73％的一致性.进一步构建该基因的超表达载体pTFC-A00981,并转化枝状枝孢霉MD2,共获得9株转基因菌株.结果:Southern blot分析证明其中5株转基因菌株的外源基因是以单拷贝方式插入.结论:该结果为深入分析超表达候选基因A00981对枝状枝孢霉MD2紫杉烷类合成的影响奠定了基础.