长枝木霉eg1基因的克隆及表达

• 作者: 朱苏文 王旭 程备久 范军 陶芳
• 来源期刊: 激光生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 长枝木霉 eg1 酿酒酵母 分泌表达
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 245-251
• 分类号: Q78
• 字数: 4023字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2012.03.010

摘要

从长枝木霉3.1029基因组中克隆了内切葡聚糖酶EG1基因,该基因全长1566 bp,由3个外显子2个内含子组成,编码461个氨基酸,编码蛋白的N端为22aa组成的信号肽.采用重叠PCR法获得无内含子的内切葡聚糖酶基因eg1,构建成pYE-Leg1重组质粒;同时将其成熟肽编码序列插入酿酒酵母分泌型表达载体pYEα中,构建成pYEα-Leg1重组质粒;分别转化酿酒酵母.重组转化子经β-半乳糖诱导,检测表达产物的酶活,结果表明,pYE-Leg1转化子无明显胞外酶活;而pYEα-Leg1转化子在刚果红平板上可产生明显的水解圈,酶活检测显示pYEα载体可有效地将该基因在酿酒酵母中表达并分泌到胞外,发酵液中的酶活在培养96 h达到最高1.16 U/mL,最适酶解温度为50℃,最适pH值为5.6.以上研究将为利用酿酒酵母生产胞外纤维素酶提供依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王旭	安徽农业大学生命科学院	6	17	3.0	3.0
2	范军	安徽农业大学生命科学院	25	187	6.0	13.0
3	朱苏文	安徽农业大学生命科学院	89	736	15.0	22.0
4	程备久	安徽农业大学生命科学院	111	852	16.0	23.0
5	陶芳	安徽农业大学生命科学院	18	95	5.0	9.0