拟康氏木霉eg1基因的克隆及在酿酒酵母中的分泌表达

• 作者: 朱苏文 江海洋 王旭 程备久 范军 陶芳
• 来源期刊: 激光生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 拟康氏木霉 eg1 酿酒酵母 分泌表达
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 809-814,801
• 分类号: Q78
• 字数: 3331字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2011.06.019

摘要

从拟康氏木霉3.3002基因组中克隆了内切葡聚糖酶EGI基因,该基因全长1566 bp,由3个外显子2个内含子组成,编码461个氨基酸.编码蛋白EGI的N端为22aa组成的信号肽,其后依次为催化结构域、连接肽和结合结构域.采用重叠PCR法获得无内含子的内切葡聚糖酶基因eg1,并将其成熟肽编码序列插入酿酒酵母分泌型表达载体pYEα中,构建成pYEα-Peg1重组质粒,转化酿酒酵母.重组转化子经β-半乳糖诱导,检测表达产物的分子大小以及酶活,结果表明,转化子在刚果红平板上可产生明显的水解圈；酶活检测显示该基因能在酿酒酵母中表达有生物活性的EG I并分泌到胞外；SDS-PAGE电泳显示EGI蛋白分子量比预期目的蛋白稍偏大.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王旭	安徽农业大学生命科学学院	6	17	3.0	3.0
2	范军	安徽农业大学生命科学学院	25	187	6.0	13.0
3	朱苏文	安徽农业大学生命科学学院	89	736	15.0	22.0
4	程备久	安徽农业大学生命科学学院	111	852	16.0	23.0
5	陶芳	安徽农业大学生命科学学院	18	95	5.0	9.0
6	江海洋	安徽农业大学生命科学学院	45	259	10.0	14.0