黑曲霉糖化酶基因克隆及在酿酒酵母中的表达

• 作者: 刘加爱 张学文 张小鹃 林元山 邹洪彬 陈蕾
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 黑曲霉 糖化酶 酿酒酵母 异源表达
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 页码范围: 121-125
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3531字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7668/hbnxb.2017.06.018

摘要

为了以酿酒酵母S78为宿主菌异源高效表达糖化酶基因,进一步扩大糖化酶基因在工业生产上的应用.运用RT-PCR法从黑曲霉中克隆得到糖化酶基因(glaA)cDNA,去除其信号肽编码区后的序列重组到酵母表达载体pVT102U/αADH1强启动子下游,并与α因子分泌肽信号序列融合.用PEG/LiAc法将构建的重组表达载体转入酿酒酵母S78菌株,筛选出的转化菌点种到可溶性淀粉平板上培养,用碘染法鉴定重组基因的表达情况.鉴定出了典型水解圈的酵母转化子,转化子接种到YPD培养基中摇瓶培养后,取发酵上清液经SDS-PAGE检测到分子量大小约为80 kDa的目标蛋白带,上清液用DNS法检测其淀粉酶最高酶活为28.86 IU/mL.表明糖化酶基因已在酿酒酵母S78中成功表达并能有效分泌到细胞外.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张学文	湖南农业大学生物科学技术学院	120	939	18.0	24.0
2	林元山	湖南农业大学生物科学技术学院	28	126	7.0	10.0
3	陈蕾	湖南农业大学生物科学技术学院	2	13	2.0	2.0
4	刘加爱	湖南农业大学生物科学技术学院	1	2	1.0	1.0
5	张小鹃	湖南农业大学生物科学技术学院	1	2	1.0	1.0
6	邹洪彬	湖南农业大学生物科学技术学院	1	2	1.0	1.0