黑曲霉木聚糖酶基因xynB的克隆及在酿酒酵母中的表达

• 作者: 张水龙 昊仁智 曹树威 陈东 黄日波
• 来源期刊: 广西科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 木聚糖酶 黑曲霉 酿酒酵母
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 页码范围: 148-151,157
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 3258字
• 语种: 中文

摘要

从黑曲霉(Aspergillus niger)克隆木聚糖酶基因xynB,利用重叠延伸PCR法去除其中的内含子.将该基因与质粒pYES2连接,构建真核表达载体,用醋酸锂化转法导人酿酒酵母(Sacharom yces cerevisiae)INVSC1菌株表达.利用α信号肽替换基因原信号肽,以考察信号肽对表达蛋白分泌的影响.结果获得2株重组菌株,分别为xynB连接原信号肽的pYES2-xynB菌株和xynB连接α信号肽的pYES2-xynB-α菌株.木聚糖酶B成功表达,SDS-PAGE检测到约24kDa目的蛋白质条带.木聚糖酶B最适催化温度为50℃,最适催化pH值为5.0,Mn2+对酶活具有强烈的抑制作用.将α信号肽取代原信号肽使酶活达到最高的诱导时间由72h缩短为48h,但是置换信号肽使最高酶活由7.59U降低为3.97U.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张水龙	广西大学生命科学与技术学院	1	6	1.0	1.0
2	陈东		3	24	3.0	3.0
3	曹树威	广西大学生命科学与技术学院	1	6	1.0	1.0
4	昊仁智		1	6	1.0	1.0