黑曲霉XZ-3S木聚糖酶基因xynZF-2在毕赤酵母中的高效表达

• 作者: 周晨妍 张振群 张青 李同彪 梁真真 王丹丹 王亚杰 路丹荣
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 黑曲霉 木聚糖酶 毕赤酵母GS115 诱导表达
• 年，卷（期）: 2015,（7）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 200-203,280
• 分类号: TS201.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2015.07.034

摘要

将黑曲霉XZ-3S木聚糖酶基因xynZF-2(成熟肽碱基)插入表达载体pPIC9K中,Sal线性化后电击转化毕赤酵母GS115,经MD平板、G418梯度和摇瓶复筛筛选出多克隆阳性转化子.选择28h的种子,每隔24h补加1.5％的甲醇,发酵96h后,比酶活可达13210 U/mg; SDS-PAGE分析表明,该蛋白相对分子质量为23.0ku;重组酶最适作用温度为45℃,最适作用pH为5.0,在温度35～40℃、pH5～7条件下有良好的稳定性,Ca2+对酶的激活作用最明显.