道地药材咸丰白术ISSR反应体系优化及多态性引物筛选

• 作者: 何银生 刘海华 卢超 周武先 张美德 段媛媛 程天周 艾伦强
• 来源期刊: 分子植物育种
• 关键词: ISSR 道地药材 白术 体系优化
• 年，卷（期）: 2018,（22）
• 所属期刊栏目: 标记辅助育种
• 页码范围: 7423-7428
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13271/j.mpb.016.007423

摘要

为了得到适宜的咸丰白术ISSR反应体系,采用两轮U12 (62×4)均匀设计的方法,对ISSR反应中各组分设置不同的梯度,分析反应体系各组分用量对扩增结果的影响.结果表明,在l8μL的ISSR反应体系中,引物0.29 μmol/L,2×Taq Master Mix 9.6 μL,模板DNA 47 ng时,扩增条带较清晰,多态性好.根据得到的优化体系,进一步开展白术的引物筛选,并从中得到了9条扩增条带相对清晰稳定、多态性较好的引物.对筛选的多态性引物开展了温度梯度PCR实验,发现温度对ISSR-PCR扩增结果影响显著.本实验通过采用均匀设计的方法,降低了常规体系优化实验所需次数,节省了时间和试剂的用量,为快速建立ISSR反应体系和后续咸丰白术遗传多样性分析提供了便利与帮助.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘海华		51	259	8.0	13.0
2	何银生		28	87	5.0	8.0
3	艾伦强		21	45	4.0	5.0
4	张美德		15	33	3.0	5.0
5	卢超		6	15	2.0	3.0
6	段媛媛		8	3	1.0	1.0
7	周武先		4	2	1.0	1.0
8	程天周		1	0	0.0	0.0