表达猪瘟E2基因的重组伪狂犬病毒 构建及其生物学特性分析

• 作者: 吴华伟 夏业才 曹明慧 李俊平 邓永 陈晓春 韩爽
• 来源期刊: 中国兽药杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 伪狂犬病毒 猪瘟病毒 基因缺失 同源重组 生物学特性
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 微生物与免疫
• 页码范围: 29-37
• 页数: 9页
• 分类号: S852.65
• 字数: 5400字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11751/ISSN.1002-1280.2018.05.05

摘要

以构建的TK、gI、gE、US9、部分gN基因缺失的绿色荧光标记猪伪狂犬病毒rPRV-BE为亲本株,通过同源重组构建了表达猪瘟病毒(CSFV C株)主要免疫原性基因E2的重组伪狂犬病毒rPRV-CSFV PE2SC.经PCR、间接免疫荧光试验(IFA)鉴定证实构建正确,并能成功表达E2蛋白.同时,对重组病毒在P K15细胞中的遗传稳定性、增殖特性等进行了研究,结果显示第5、10、15、20代重组病毒经PCR均能扩增出与原代重组病毒相同大小的约为3469 bp含猪瘟病毒E2基因的重组片段;第20代重组病毒感染细胞孔中出现明显的针对E2蛋白的荧光,表明重组病毒在体外连续传20代后仍能稳定遗传.一步生长曲线测定结果表明,与野毒PRV(SX株)、亲本毒rPRV-BE相比,重组病毒rPRV-CSFV PE2SC前期增殖速度较快,病毒滴度到达峰值的时间早,峰值病毒滴度低于野毒,与亲本毒相当,最高病毒滴度依次为106.7 TCID50/mL、108.0 TCID50/mL、107.0 TCID50/mL.结果显示构建的重组病毒具有良好的遗传稳定性及体外复制能力,为进一步对其免疫效果的评价以及P RV基因缺失重组疫苗的研制奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李俊平		46	230	8.0	14.0
2	邓永		27	149	6.0	11.0
3	曹明慧		11	21	3.0	4.0
4	吴华伟		38	111	6.0	8.0
5	陈晓春		20	74	5.0	7.0
6	韩爽		3	9	2.0	3.0
7	夏业才		36	203	8.0	12.0