基于核酸横流生物传感器的沙门氏菌快速、可视化检测方法

• 作者: 万家余 付兵 吴海燕 孙秀伟 常洪标 武志敏 王奎宇 王月 陈志宝
• 来源期刊: 黑龙江八一农垦大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 核酸横流生物传感器 沙门氏菌 生物素化双链DNA 灵敏性比较 可视化检测
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 63-68,81
• 页数: 7页
• 分类号: Q7
• 字数: 4197字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2090.2018.06.011

摘要

为了建立沙门氏菌的快速、可视化检测方法,根据核酸横流生物传感器(lateral flow nucleic acid biosensor,LFNAB)的检测原理,对沙门氏菌核酸扩增产物进行改良.以沙门氏菌DNA为模板,通过PCR技术和DNA酶的介导,将生物素-三磷酸碱基脱氧核苷酸(Biotin-dNTP)引入DNA链中,使高拷贝的DNA双链携带一定含量的生物素分子.在DNA链上,由于上游引物修饰的异硫氰酸荧光素抗原(FAM)和dNTP上携带的生物素分子(Biotin),导致新产生的PCR产物可采用LFNAB进行检测.实验证明,Biotin-dUTP最佳的使用量是脱氧胞嘧啶核苷三磷酸(dTTP)和Biotin-dUTP混合物的总量的5％,且LFNAB的样品检验效果清晰直观、肉眼可见,能够检测出101 CFU·mL-1浓度的沙门氏菌.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈志宝	黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院	85	335	9.0	14.0
2	吴海燕	黑龙江八一农垦大学动物科技学院	25	196	9.0	13.0
3	王月	黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院	13	36	4.0	6.0
4	孙秀伟	长春军事医学科学院军事兽医研究所	1	0	0.0	0.0
5	付兵	黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院	1	0	0.0	0.0
6	王奎宇	黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院	1	0	0.0	0.0
7	常洪标	长春军事医学科学院军事兽医研究所	1	0	0.0	0.0
8	万家余	长春军事医学科学院军事兽医研究所	1	0	0.0	0.0