转基因水稻BPL9K-2事件特异性检测方法的建立

• 作者: 于江辉 崔帅 王作平 肖国樱
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 转基因水稻 旁侧序列 事件特异性检测 基因型鉴定
• 年，卷（期）: 2018,（11）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 32-41
• 页数: 10页
• 分类号: Q812
• 语种: 中文
• DOI: 10.13523/j.cb.20181105

摘要

利用hiTAIL-PCR(high efficient thermal asymmetric interlaced PCR)法扩增获得了转基因水稻BPL9K-2的外源基因插入位点的左旁侧序列450bp,与水稻参考基因组数据比对发现其左边界插入在水稻基因组第10号染色体短臂的1 037 765位核苷酸残基之后.根据水稻参考基因组序列和外源基因右边界序列,设计引物扩增得到485bp的特异片段,通过数据库比对发现其右边界插入在水稻基因组第10号染色体短臂的1 037 825位核苷酸残基之前.因为外源基因插入和非正常重组,水稻基因组上缺失了59个核苷酸.基于左右旁侧序列,建立了转基因水稻BPL9K-2的事件特异性定性PCR检测方法,可以分别扩增到片段大小为449bp和485bp的特异条带.该方法特异性好,灵敏度高,能够在BPL9K-2基因组DNA相对含量为0.1％的模板中检测出转基因成分.依据旁侧序列,建立了快速鉴定转基因后代植株外源基因型的三引物PCR检测方法.这些方法的建立,为转基因水稻BPL9K-2的应用和检测提供了技术支持.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	肖国樱	中国科学院亚热带农业生态研究所亚热带农业生态过程重点实验室	82	1161	20.0	29.0
2	王作平	中国科学院亚热带农业生态研究所亚热带农业生态过程重点实验室	3	13	1.0	3.0
4	于江辉	中国科学院亚热带农业生态研究所亚热带农业生态过程重点实验室	13	68	4.0	8.0
5	崔帅	中国科学院亚热带农业生态研究所亚热带农业生态过程重点实验室	14	39	4.0	6.0