大肠杆菌中dctA基因敲除及其苹果酸摄取功能鉴定

• 作者: 姜巨全 孟琳 张正来 徐桐
• 来源期刊: 东北农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 大肠杆菌K12 dctA λRed重组 基因敲除 四碳-2-羟基羧酸
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 页码范围: 45-52
• 页数: 8页
• 分类号: Q933|Q751
• 字数: 5434字
• 语种: 中文

摘要

大肠杆菌(Escherichia coli K12基因组中,仅dctA基因编码1个在有氧条件下负责摄取四碳-二羧酸的转运蛋白.为鉴定DctA能否摄取四碳-2-羟基羧酸(如苹果酸),首先以pKD3为模版PCR扩增含有氯霉素抗性dctA基因同源臂,电转入E.coli K12/pKD46感受态细胞,筛选具有氯霉素抗性的基因敲除突变株E.coli △dctA/pKD46.通过消除质粒pKD46构建大肠杆菌dctA基因敲除突变株E.coli △dctA.构建dctA基因表达载体pEasyT3-dctA.通过苹果酸摄取功能互补试验,证实基因敲除菌株E.coli △dctA丧失摄取苹果酸功能,四碳-二羧酸摄取蛋白DctA具有摄取苹果酸功能.研究首次报道DctA具有摄取苹果酸功能,该基因敲除突变株的构建可为其他菌株来源2-HCT转运蛋白的基因克隆与功能分析奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姜巨全	东北农业大学生命科学学院	9	9	2.0	3.0
2	张正来	东北农业大学生命科学学院	2	0	0.0	0.0
3	徐桐	东北农业大学生命科学学院	2	0	0.0	0.0
4	孟琳	东北农业大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0