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摘要:
采用PCR方法扩增PPV6保守区域基因252 bp,将其克隆到pClon007载体,构建重组质粒作为标准阳性质粒.以质粒模板建立PPV6的SYBR Green Ⅰ real-time PCR检测方法,并进行敏感性、特异性和重复性等验证.结果表明,重组质粒特异性好;建立的real-time PCR方法Ct值与标准品模板在8.80×109~8.80×101 copies/μL范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.993,斜率为-4.320.该方法检测灵敏度可达8.80×101 copies/μL.该方法对JEV、PRV、PRRSV、PCV2、FMDV等猪常见病原检测均无特异性扩增;对临床样品的检测结果表明,所建立的荧光定量PCR阳性检测率为40.63%.本试验成功建立了PPV6 SYBR Green Ⅰ real-time PCR检测方法,可实现对PPV6快速灵敏的诊断.
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文献信息
篇名 猪细小病毒6型SYBR Green Ⅰ real-time PCR检测方法的建立
来源期刊 中国兽医学报 学科 农学
关键词 猪细小病毒6型 SYBR Green Ⅰ 荧光定量PCR
年,卷(期) 2018,(3) 所属期刊栏目 预防兽医学
研究方向 页码范围 442-445,452
页数 5页 分类号 S858.28
字数 语种 中文
DOI 10.16303/j.cnki.1005-4545.2018.03.02
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研究主题发展历程
节点文献
猪细小病毒6型
SYBR Green Ⅰ
荧光定量PCR
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国兽医学报
月刊
1005-4545
22-1234/R
大16开
长春市西安大路5333号
12-105
1981
chi
出版文献量(篇)
7291
总下载数(次)
8
总被引数(次)
50005
论文1v1指导