细粒棘球绦虫转酮醇酶克隆表达及免疫性分析

• 作者: 刘佳 姜博璠 张耀刚 曹得萍 李超群
• 来源期刊: 中国血吸虫病防治杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 细粒棘球绦虫 棘球蚴病 转酮醇酶 重组质粒 诊断抗原
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 155-160
• 页数: 6页
• 分类号: R383.33
• 字数: 5010字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16250/j.32.1374.2017229

摘要

目的 通过原核表达获得细粒棘球绦虫转酮醇酶(TK)表达产物,分析其作为棘球蚴病诊断抗原分子的价值.方法 PCR扩增TK基因,克隆至原核载体pMD19-EgTK,随后亚克隆至表达载体pET-28a,构建目的基因TK原核表达质粒pET-28a(+)-EgTK,转入大肠埃希菌BL21,分离纯化蛋白,经SDS-PAGE、Western blotting鉴定后,收集细粒棘球蚴病(CE组)、多房棘球蚴病(AE组)患者及健康人(健康组)血清,以酶联免疫吸附试验(ELISA)检测重组蛋白作为诊断抗原的价值.结果 成功构建pET-28a(+)-EgTK质粒,经SDS-PAGE和Western blotting分析,EgTK蛋白在70 kDa处出现条带,与理论值一致.ELISA显示,CE组、AE组和健康组血清反应吸光度A450值间差异有统计学意义(F=44.47,P<0.01), CE组(1.46±0.41)、AE组A450值(1.28±0.29)高于健康组(0.66±0.23)(P<0.05),但CE组和AE组间A450值差异无统计学意义(P>0.05).结论 重组TK分子可较好地区分棘球蚴病患者和非棘球蚴病患者,但无法区分细粒棘球蚴病和多房棘球蚴病患者.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张耀刚	青海大学附属医院、青海省包虫病研究重点实验室	14	12	2.0	2.0
2	李超群	青海大学医学院病原生物学教研室	15	11	2.0	2.0
3	曹得萍	青海大学医学院病原生物学教研室	35	74	4.0	6.0
7	姜博璠	青海大学医学院病原生物学教研室	5	4	2.0	2.0
8	刘佳	青海大学医学院病原生物学教研室	2	2	1.0	1.0