犬新孢子虫巨噬细胞转移抑制因子的原核表达

• 作者: 唐世云 曲光刚 武曰星 沈志强 王长江 金婷婷
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 犬新孢子虫 巨噬细胞转移抑制因子 原核表达 免疫印迹
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 34-39
• 页数: 6页
• 分类号: S852.43|S852.723
• 字数: 4148字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2018.02.006

摘要

为筛选犬新孢子虫保护性抗原,克隆表达犬新孢子虫巨噬细胞转移抑制因子(MIF)并对其免疫原性进行分析.根据GenBank公布的犬新孢子虫MIF(NcMIF)序列,利用分子生物学软件设计2套特异性引物,以NcMIF mRNA反转录产物为模版,采用PCR扩增出NcMIF基因和2种突变基因NcMIFm和Nc-MIFhis,选用原核表达载体pET26b,分别构建重组质粒pET26b-NcMIF和pET26b-NcMIFm.重组质粒分别转入E.coli BL21 (DE3)中进行表达,纯化后的蛋白利用免疫印迹法进行鉴定.结果显示,rNcMIF和rNcMIFm这2种重组蛋白在BL21(DE3)表达菌株中均为可溶性表达,诱导表达最佳条件为30℃诱导3hIPTG诱导浓度为1 mmol/L;Western blot分析结果表明,该表达产物能与抗rNcMIF绵羊血清发生反应,说明获得的蛋白具有较好的抗原性和特异性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈志强		525	1950	18.0	25.0
5	唐世云		12	30	4.0	5.0
6	曲光刚		22	99	6.0	9.0
7	王长江		5	2	1.0	1.0
8	武曰星		5	2	1.0	1.0
9	金婷婷		3	0	0.0	0.0