猪圆环病毒Ⅱ型Cap蛋白的原核表达、纯化和鉴定

• 作者: 吴思敏 朱传刚 李嘉静 李浩 林矫矫 江嘉欣 洪炀 王钊哲 石耀军 蔡爱群 许瑞 陆珂 陈兆国
• 来源期刊: 医学动物防制
• 学科: 农学
• 关键词: 猪圆环病毒 Cap蛋白 表达纯化
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 671-675
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文
• DOI: 10.7629/yxdwfz201807016

摘要

目的 对猪圆环病毒 (Porcine circovirus, PCV) Cap蛋白的主要B细胞抗原表位进行分析, 构建Cap表达多表位的原核表达系统, 并对表达的目的蛋白进行分析, 为猪圆环病毒诊断试剂开发奠定基础.方法 设计并合成PCV2Cap基因, 与PET-28a (+) 载体连接后并转入大肠杆菌BL21 (DE3) 中构建重组质粒PET-28 (a) -Cap, 对重组质粒进行诱导表达获得重组蛋白, 通过His亲和层析柱对重组蛋白进行纯化.结果 重组质粒在大肠杆菌中成功表达, 蛋白质分子量约为17.4 k Da, 与预期相符;Western blot结果显示, 重组蛋白可以与猪圆环病毒阳性血清发生特异性结合.结论 PCV2 Cap蛋白的表达纯化为圆环病毒血清抗体诊断方法的建立, 进而为养殖场有效监控猪圆环病毒的免疫保护情况奠定基础.