解脲脲原体UPA3-0382基因原核表达载体的构建与表达分析

• 作者: 李春亮 李雪燕 栗晓燕 贾天军 贾泽玮 赫聪慧
• 来源期刊: 中国细胞生物学学报
• 关键词: 解脲脲原体 UPA3-0382 原核表达 生物信息学分析
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1376-1383
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11844/cjcb.2018.08.0074

摘要

为了探讨解脲脲原体UPA3-0382基因的功能, 该研究构建了解脲脲原体UPA3-0382基因的原核表达载体, 并对其表达蛋白进行了初步的生物信息学分析.首先, 利用PCR方法克隆得到624 bp的UPA3-0382基因, 使用限制性内切酶Bam H I和Not I酶切目的基因和质粒p GEX-6P-2, 并用T4连接酶连接后转化入大肠埃希菌感受态XL1-Blue中, 并诱导表达蛋白, 而后运用生物信息学软件分析编码蛋白的结构及功能.结果显示, 克隆出的UPA3-0382基因测序结果经Blast比对显示同源性为100％, 表达出分子量约为50 k Da的GST-UPA3-0382融合蛋白, 大小与预期一致, 经生物信息学软件分析该蛋白由207个氨基酸组成, 分子式为C1075H1749N305O348S3, 分子量为24.62 k Da, 理论等电点为6.40.二级结构中含有α-螺旋、β-折叠、β-转角及无规则卷曲, 比例分别为48.79％、16.91％、7.25％和27.05％, 无信号肽及跨膜区域, 蛋白质空间结构及功能预测显示, 该蛋白为假设蛋白, 推测其可能参与了解脲脲原体信号转导与能量代谢等作用, 为进一步研究解脲脲原体奠定了基础.