IL-17RA基因过表达慢病毒载体的构建及鉴定

• 作者: 何丹 吴振华 王洪江
• 来源期刊: 新疆医学
• 学科: 医学
• 关键词: 白介素-17受体A 慢病毒 载体构建 过表达
• 年，卷（期）: 2018,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 942-945,925
• 页数: 5页
• 分类号: R392.12|R734.2
• 字数: 3263字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建白介素17受体A(IL-17RA)基因过表达慢病毒载体.方法 采用聚合酶链反应(PCR)扩增制备IL-17RA cDNA;将IL-17RA cDNA连接于用Age1酶切消化获得的线性化GV358载体;对PCR法鉴定为阳性克隆的IL-17RA-GV358载体进行测序;将IL-17RA-GV 358载体用pHelper 1.0和pHelper 2.0共转染到293T细胞获得IL-17RA慢病毒包装,运用荧光法行滴度检测;用IL-17RA-GV358重组慢病毒转染293T细胞,观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达,运用RT-PCR、Western blot检测IL-17RA mRNA及蛋白的表达.结果 IL-17RA-GV358重组慢病毒转染293T细胞后可观察到荧光,结果显示在稳定转染的细胞中IL-17RA mRNA及蛋白的表达水平较未转染细胞显著增高.结论 成功构建IL-17RA-GV358慢病毒载体,为IL-17RA基因的后期研究提供了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王洪江	新疆医科大学附属肿瘤医院胸外科	60	195	7.0	10.0
2	吴振华	新疆医科大学附属肿瘤医院胸外科	22	141	6.0	11.0
3	何丹	新疆医科大学附属肿瘤医院胸外科	26	90	5.0	9.0