丹参均一化酵母双杂交文库的构建及与SmJAZ8互作蛋白的筛选

• 作者: 杨梦丹 赵英 麻鹏达
• 来源期刊: 中国中药杂志
• 关键词: 丹参 均一化 酵母双杂交 序列分析
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 分子生药学
• 页码范围: 484-492
• 页数: 9页
• 语种: 中文

摘要

为构建高质量的丹参cDNA文库以及通过酵母双杂交获得丹参SrnJAZ8互作蛋白基因.研究以丹参的根、茎、叶、花、毛状根为材料,利用SMART(switching mechanism at 5'end of RNA transcript)方式合成全长cDNA,并结合基于双链的特异性核酸酶(duplex-specific nuclease,DSN)均一化技术,构建丹参的均一化全长cDNA文库.通过文库鉴定,检测到cDNA文库库容为1.45 × 106,重组率为100％,插入片段平均大小为500 ～2 000 bp.构建pDEST-pGADT7-SmJAZ8重组载体,将该载体转化Y2HGold菌种,通过酵母双杂交进行互作蛋白的筛选,最终筛选到了丹参DnaJ蛋白和UBQ蛋白.该研究既成功构建了丹参均一化全长cDNA文库,又为后续丹参功能基因筛选和基因功能的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵英	西北农林科技大学理学院	30	171	7.0	12.0
2	麻鹏达	西北农林科技大学生命科学学院	12	33	4.0	4.0
3	杨梦丹	西北农林科技大学生命科学学院	2	7	2.0	2.0